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用这个方法来操作昆虫elisa检测试剂盒效果更好哦!

2019-08-15      23
  昆虫elisa检测试剂盒是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被昆虫捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的昆虫呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
 
  昆虫elisa检测试剂盒的操作流程:
  1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
  2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。
  3、样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
  4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
  5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
  6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
 
  昆虫elisa检测试剂盒的注意事项:
  1、试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
  2、各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间Z好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
  3、请每次测定的同时做标准曲线,Z好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
  4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  5、底物请避光保存。
  6、严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准。
  7、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
  8、本试剂不同批号组分不得混用。
  10、如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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